0512-63061203
慢病毒載體（Lentivirus vectors）的特性：在非分裂和分裂細(xì)胞中穩(wěn)定整合、轉(zhuǎn)基因的長(zhǎng)期表達(dá)、低免疫原性，使其成為基因治療的理想基因轉(zhuǎn)移載體。轉(zhuǎn)基因可以在非分裂或終末分化的非常靜止的細(xì)胞（例如神經(jīng)元）中實(shí)現(xiàn)。我們的慢病毒載體來(lái)源于HIV-1病毒，序列經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化，提高了生物安全性、基因表達(dá)水平和病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。慢病毒顆粒通常是在包裝細(xì)胞中共表達(dá)病毒體包裝元件和載體基因組來(lái)產(chǎn)生的。我們開(kāi)發(fā)出了一系列專有技術(shù)和試劑，從病毒滴度、純度、活性以及一致性等方面提升了慢病毒包裝工藝水平。
| 目錄號(hào) | 產(chǎn)品信息 | 規(guī)格 | 滴度 | 價(jià)格（CNY） | 生產(chǎn)時(shí)間 |
|---|---|---|---|---|---|
| H101 | 干擾慢病毒（一個(gè)干擾病毒） | 1ml | 1*108TU/ML | ￥2999 | 15個(gè)工作日 |
| H102 | 干擾慢病毒套餐（三個(gè)干擾病毒一個(gè)陰性對(duì)照） | 4*1ml | 1*108TU/ML | ￥7880 | 20個(gè)工作日 |
| H103 | 過(guò)表達(dá)慢病毒2000bp以下 | 1ml | 1*108TU/ML | 基因長(zhǎng)度*￥1+￥3880 | 咨詢 |
| H104 | 過(guò)表達(dá)慢病毒4000bp以下 | 1ml | 1*108TU/ML | 基因長(zhǎng)度*￥1.2+￥3999 | 咨詢 |
| H105 | 慢病毒陰性對(duì)照 | 1ml | 1*108TU/ML | ￥1500 | 10個(gè)工作日 |
| 生產(chǎn)規(guī)格 | 非純化慢病毒制備服務(wù) | 純化慢病毒制備服務(wù) |
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| 交付內(nèi)容 |
定制病毒，按照規(guī)格交付：
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定制病毒，按照規(guī)格交付：
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對(duì)照病毒，按照定制病毒的規(guī)格對(duì)應(yīng)贈(zèng)送：
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對(duì)照病毒，按照定制病毒的規(guī)格對(duì)應(yīng)選購(gòu)：
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聚凝胺（Polybrene，5 mg/ml，200 ul），贈(zèng)送 |
聚凝胺（Polybrene，5 mg/ml，200 ul），贈(zèng)送 |
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輔助病毒，按照定制病毒的規(guī)格對(duì)應(yīng)選購(gòu)：
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輔助病毒，按照定制病毒的規(guī)格對(duì)應(yīng)選購(gòu)：
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| 病毒重懸液 | 慢病毒專用儲(chǔ)存液 | 慢病毒專用儲(chǔ)存液 |
| 運(yùn)輸/存儲(chǔ) | 干冰/-80°C，避免反復(fù)凍融 | 干冰/-80°C，避免反復(fù)凍融 |
| 推薦應(yīng)用 | 體外培養(yǎng)細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo) | 體外培養(yǎng)細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo)、動(dòng)物體內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo) |
為了更好地開(kāi)展您的實(shí)驗(yàn)，我們按照“對(duì)照病毒與定制病毒的生物學(xué)應(yīng)用相匹配”的原則給您贈(zèng)送或者推薦對(duì)照病毒。例如，如果定制病毒表達(dá)一個(gè)基因，則推薦的對(duì)照病毒表達(dá)熒光蛋白EGFP。如果定制病毒表達(dá)打靶某個(gè)基因的shRNA，則對(duì)照病毒表達(dá)一個(gè)Scramble shRNA。推薦的對(duì)照病毒信息如下表所示：
| 對(duì)照病毒 | 對(duì)照載體名稱 | 對(duì)照載體ID | 定制病毒 |
|---|---|---|---|
EGFP對(duì)照慢病毒，EGFP/mCherry雙熒光，Puro抗性 |
pLV[Exp]-EGFP:T2A:Puro-EF1A>mCherry |
VB010000-9298rtf | 哺乳動(dòng)物基因表達(dá)慢病毒（包含Tet-On誘導(dǎo)表達(dá)和FLEX條件性表達(dá)）、哺乳動(dòng)物CRISPR慢病毒、哺乳動(dòng)物非編碼RNA表達(dá)慢病毒 |
Scramble shRNA對(duì)照慢病毒，EGFP熒光，Puro抗性 |
pLV[shRNA]-EGFP/Puro-U6>Scramble_shRNA |
VB010000-0009mxc | 哺乳動(dòng)物shRNA干擾慢病毒 |
Scramble miR30-shRNA對(duì)照慢病毒，EGFP/mCherry雙熒光，Puro抗性 |
pLV[miR30]-EGFP/Puro-EF1A>mCherry:Scramble_miR30-shRNA |
VB010000-9387zjj | 哺乳動(dòng)物miR30-shRNA干擾慢病毒 |
Scramble msgRNA對(duì)照慢病毒，EGFP熒光，Puro抗性 |
pLV[msgRNA]-EGFP/Puro-U6>Scramble_gRNA |
VB010000-9298rtf | 哺乳動(dòng)物msgRNA表達(dá)慢病毒（dCas9-SAM系統(tǒng)元件之一） |
TRE-mCherry對(duì)照慢病毒，EGFP/mCherry雙熒光，Puro抗性（選購(gòu)） |
pLV[TetOn]-EGFP/Puro-TRE>mCherry |
VB180820-1492jrb | 哺乳動(dòng)物基因Tet-On誘導(dǎo)表達(dá)TRE慢病毒 |
FLEX-mCherry對(duì)照慢病毒，EGFP/mCherry雙熒光，Puro抗性（選購(gòu)） |
pLV[FLEXon]-EGFP/Puro-EF1A>LL:rev(mCherry):rev(LL) |
VB010000-9324qqg | 哺乳動(dòng)物基因FLEX條件性表達(dá)慢病毒 |
為了更好地開(kāi)展您的實(shí)驗(yàn)，我們按照“輔助病毒與定制病毒的生物學(xué)應(yīng)用相匹配”的原則給您推薦輔助病毒。例如，如果定制病毒是一個(gè)只含TRE啟動(dòng)子的TetOn慢病毒，則需要一個(gè)表達(dá)rtTA的輔助病毒，才能進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)實(shí)驗(yàn)。推薦的輔助病毒信息如下表所示：
| 對(duì)照病毒 | 對(duì)照載體名稱 | 對(duì)照載體ID | 定制病毒 |
|---|---|---|---|
Cas9慢病毒，Hygro抗性（選購(gòu)） |
pLV[Exp]-CBh>hCas9/Hygro |
VB010000-9380sne | 哺乳動(dòng)物gRNA慢病毒（不含Cas9） |
MS2/P65/HSF1慢病毒（dCas9-SAM系統(tǒng)元件之一），Hygro抗性（選購(gòu)） |
pLV[Exp]-EF1A>MS2/P65/HSF1/Hygro |
VB010000-9383ffr | 哺乳動(dòng)物msgRNA表達(dá)慢病毒（dCas9-SAM系統(tǒng)元件之一） |
dCas9/VP64慢病毒（dCas9-SAM系統(tǒng)元件之一），Bsd抗性（選購(gòu)） |
pLV[Exp]-EF1A>dCas9/VP64/Bsd |
VB010000-9384wwc | 哺乳動(dòng)物msgRNA表達(dá)慢病毒（dCas9-SAM系統(tǒng)元件之一） |
Cre慢病毒，Hygro抗性（選購(gòu)） |
pLV[Exp]-CMV>Cre/Hygro |
VB010000-9372bck | 哺乳動(dòng)物基因FLEX條件性表達(dá)慢病毒 |
tTS/rtTA慢病毒，Hygro抗性（選購(gòu)） |
pLV[Exp]-CMV>tTS/rtTA/Hygro |
VB010000-9369xhm | 哺乳動(dòng)物基因Tet-On誘導(dǎo)表達(dá)TRE慢病毒 |
| 步驟 | 描述 | 時(shí)間 |
|---|---|---|
 Co-transfection |
我們常規(guī)使用的第三代慢病毒包裝系統(tǒng)包括1個(gè)轉(zhuǎn)移質(zhì)粒（Transfer plasmid）、1個(gè)膜蛋白表達(dá)質(zhì)粒（Envelope plasmid）、2個(gè)包裝質(zhì)粒（Packaging plasmids），將這些質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染包裝細(xì)胞。2個(gè)包裝質(zhì)粒分別為Gag/Pol表達(dá)質(zhì)粒和Rev表達(dá)質(zhì)粒。 | 第1天 |
 Supernatant collection |
在細(xì)胞里，轉(zhuǎn)移質(zhì)粒轉(zhuǎn)錄出攜帶目的基因（Gene of Interest，簡(jiǎn)稱GOI）的HIV RNA基因組，與包裝質(zhì)粒表達(dá)出的衣殼結(jié)構(gòu)蛋白、酶、調(diào)控蛋白組裝成病毒顆粒后，轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)，形成包膜病毒分泌到胞外。膜蛋白質(zhì)粒表達(dá)的VSV-G膜蛋白錨定在細(xì)胞膜上，隨著病毒成熟，與細(xì)胞膜一起成為了病毒的膜。細(xì)胞短暫孵育后，收集上清，離心去除細(xì)胞碎片并過(guò)濾。 | 第3天 |
 Concentration and purification |
PEG濃縮病毒顆粒。對(duì)于超純化慢病毒（體內(nèi)應(yīng)用級(jí)別），采用蔗糖離心方法進(jìn)一步純化、濃縮病毒。 | 第4天 |
 Quality Control |
對(duì)病毒進(jìn)行滴度測(cè)定（Titer determination）、微生物檢測(cè)（Bioburden test，針對(duì)細(xì)菌、真菌）、支原體檢測(cè)（Mycoplasma test）等。 若轉(zhuǎn)移載體同時(shí)編碼一個(gè)熒光蛋白，我們還會(huì)將病毒進(jìn)行細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo)以測(cè)定相應(yīng)的熒光表達(dá)情況（Transduction test）。此外，對(duì)于超純化慢病毒，我們還可以檢測(cè)內(nèi)毒素水平（Endotoxin test）。 |
第5天及以后 |
注意： 第三代慢病毒包裝系統(tǒng)只能包裝第三代的慢病毒轉(zhuǎn)移載體。但是第二代慢病毒包裝系統(tǒng)既能包裝第二代，也能包裝第三代的慢病毒轉(zhuǎn)移載體。第三代慢病毒轉(zhuǎn)移載體上的5’ LTR中的U3元件是被一個(gè)外源啟動(dòng)子替代（如CMV啟動(dòng)子或者RSV啟動(dòng)子），使其不依賴Tat蛋白進(jìn)行HIV RNA基因組的轉(zhuǎn)錄，故第三代慢病毒包裝系統(tǒng)的包裝質(zhì)粒不含Tat蛋白。第二代慢病毒轉(zhuǎn)移載體上的5’ LTR是野生型的LTR，含有U3、R和U5元件，依賴Tat蛋白轉(zhuǎn)錄HIV RNA基因組，故第二代慢病毒包裝系統(tǒng)的包裝質(zhì)粒含有Tat蛋白。
我們的滴度保證僅適用于這樣的轉(zhuǎn)移載體
對(duì)于如下這樣的轉(zhuǎn)移載體，我們不能保證滴度：
交付周期是指訂單接收到發(fā)貨之間的時(shí)間，不包括需要客戶提供任何物料（如病毒載體）的等待時(shí)間。對(duì)于不含有熒光標(biāo)記，但是含有藥篩標(biāo)記的病毒載體，如果您需要獲得細(xì)胞藥篩效果的質(zhì)檢結(jié)果，由于細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)需要較長(zhǎng)時(shí)間觀察，周期將額外增加15-20天。
如需客戶提供慢病毒載體，則請(qǐng)按照外來(lái)物品接收指南將載體寄送給我們。請(qǐng)嚴(yán)格按照我們的指南來(lái)進(jìn)行裝運(yùn)以免造成物品的任何延誤和損壞?？蛻籼峁┑乃胁牧暇杞?jīng)過(guò)QC檢測(cè)，每一份材料附加檢測(cè)費(fèi)用。請(qǐng)注意，客戶提供物品接收并通過(guò)QC之后生產(chǎn)才正式開(kāi)始。
